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                  GV-CT-DNA植物基因組DNA提取試劑盒(CTAB法)

                  Genview


                  CAS號(hào):

                  訂貨號(hào)

                  Cat #:GV-CT-DNA-50/ GV-CT-DNA-100
                  一、試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性

                  成分
                  50 T
                  100T 注意事項(xiàng)
                  Buffer GA1
                  45ml 
                  90ml (1)試劑中有巰基乙醇,有稍微
                  的刺激性氣味屬正常 。
                  (2)-20℃保存.

                  Buffer GA2
                  50ml 
                  100ml
                  Buffer GA3 
                  2ml 
                  4ml
                  Buffer GA4
                  500μl
                  1ml 
                  2ml 離心管
                  50 個(gè)×2
                  50 個(gè)×4
                  Handbook
                  1 1

                  二、自備試劑
                  氯仿、異戊醇、乙醇、滅菌雙蒸水
                  三、操作步驟
                  1. 取植物新鮮組織 50mg 或者干粉樣品 30mg,加入液氮充分研磨成粉末狀。樣品量不應(yīng)超過(guò) 50mg(干
                  粉樣品 30mg),過(guò)多的樣品使得裂解不充分,最終會(huì)導(dǎo)致基因組 DNA 提取量減少且純度低。
                  2. 將粉末放到裝有 800ul Buffer GA1 的 2ml 離心管,60℃預(yù)熱 30min。
                  3. 其間混勻 2~3 次,取出樣品于室溫放置。(如需消化 RNA,可在此步驟加入 Buffer GA4 ,室溫放置 10min)
                  4. 待樣品冷卻到室溫,加入 800ul 氯仿:異戊醇(24:1)。
                  5. 振蕩混勻,12000rpm 離心 15min。
                  6. 取上清到一新離心管中加入 1.5 倍體積 Buffer GA2(1ml 左右)。
                  7. 放置 20—30min,12000rpm 離心 15min,輕輕去掉上清。
                  8. 將沉淀晾干溶于 200ul TE-buffer 或滅菌雙蒸水(溶解)。
                  9. 加入 400ul 無(wú)水乙醇,20ul Buffer GA3,-20℃沉淀 1h。
                  10.4℃12000rpm 離心 15min,輕輕去掉上清。
                  11.500ul 75%乙醇洗,12000rpm 離心 10min,輕輕去掉上清。
                  12.加入 30-50ul TE buffer 或滅菌雙蒸水溶 DNA。
                  13.瓊脂糖電泳檢測(cè)(用 0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),電泳緩沖液 0.5×TBE)。


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