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CAS號(hào):
50T
盒
¥200元
¥200 元
4-5天
100T
盒
¥380元
¥380 元
4-5天
Cat #:GV-CT-DNA-50/ GV-CT-DNA-100
一、試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性
成分
50 T
100T
注意事項(xiàng)
Buffer GA1
45ml
90ml
(1)試劑中有巰基乙醇,有稍微
的刺激性氣味屬正常 。
(2)-20℃保存.
Buffer GA2
50ml
100ml
Buffer GA3
2ml
4ml
Buffer GA4
500μl
1ml
2ml 離心管
50 個(gè)×2
50 個(gè)×4
Handbook
1
1
二、自備試劑
氯仿、異戊醇、乙醇、滅菌雙蒸水
三、操作步驟
1. 取植物新鮮組織 50mg 或者干粉樣品 30mg,加入液氮充分研磨成粉末狀。樣品量不應(yīng)超過(guò) 50mg(干
粉樣品 30mg),過(guò)多的樣品使得裂解不充分,最終會(huì)導(dǎo)致基因組 DNA 提取量減少且純度低。
2. 將粉末放到裝有 800ul Buffer GA1 的 2ml 離心管,60℃預(yù)熱 30min。
3. 其間混勻 2~3 次,取出樣品于室溫放置。(如需消化 RNA,可在此步驟加入 Buffer GA4 ,室溫放置 10min)
4. 待樣品冷卻到室溫,加入 800ul 氯仿:異戊醇(24:1)。
5. 振蕩混勻,12000rpm 離心 15min。
6. 取上清到一新離心管中加入 1.5 倍體積 Buffer GA2(1ml 左右)。
7. 放置 20—30min,12000rpm 離心 15min,輕輕去掉上清。
8. 將沉淀晾干溶于 200ul TE-buffer 或滅菌雙蒸水(溶解)。
9. 加入 400ul 無(wú)水乙醇,20ul Buffer GA3,-20℃沉淀 1h。
10.4℃12000rpm 離心 15min,輕輕去掉上清。
11.500ul 75%乙醇洗,12000rpm 離心 10min,輕輕去掉上清。
12.加入 30-50ul TE buffer 或滅菌雙蒸水溶 DNA。
13.瓊脂糖電泳檢測(cè)(用 0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),電泳緩沖液 0.5×TBE)。